浙江省稽阳联谊2024届高三下学期二模生物试题变式题21-23 Word版含解析

3.0 envi 2025-01-14 4 4 1.69MB 32 页 3知币

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为探究猪 SLA-2 抗原的呈递规律。研究者运用基因工程手段将 SLA-2 基因进行改造并在猪肾上皮细胞

（sT2 细胞）中表达。实验的主要流程如图 1，图 1中SLA-2 基因长度为 1100bp，质粒 B的总长度为

4445bp，其限制酶切点后的数字表示距复制原点的距离。图 1中的限制酶的识别序列及切割位点如图 2所

示。请回答：

1. 过程①中，PCR 扩增目的基因的反应体系为________（写出 3种即可）和引物等.

2. 下列 4种引物中应选择的是________。

A. 5'-GCTCTAGAATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC

B. 5'-GTTGCGGCCGCTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC

C. 5'-GCGATCATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC

D. 5'-GTTTGATCACTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC

3. 控制表达载体大量扩增的组成元件是________，该结构发挥作用时通常需要的酶是________。

4. 若用 Sau3AI 和 XbaI 完全酶切质粒 C后电泳，请在答题纸相应位置画出可能得到的电泳条带，同时标出

DNA 片段长度。（不考虑 PCR 时所用的引物长度对结果的影响）________

5. 科研中常用嘌呤霉素对真核细胞进行筛选，一般选择最低致死浓度的前一个浓度作为筛选浓度的原因是：

既可以让大部分没有抗性的细胞死亡又不会让________。用没有抗性的细胞实验，实验结果如下图 3，根

据实验结果最佳的嘌呤霉素筛选浓度为________。

6. 过程⑥的受体细胞是________，为了提高该细胞克隆培养的成功率，应把它放在 37°C 的________中进

行培养。

7. 过程⑦研究人员用________（填物质）检测肾上皮细胞生产的抗原肽。

【答案】1. Taq DNA 聚合酶、4种dNTP、缓冲液 2. AB

3. . ①复制原点 ②. 解旋酶和 DNA 聚合酶

4. 5. . ①具有抗性的细胞死亡 ②. 300ug/mL

6. . ①猪肾上皮细胞 ②. CO2培养箱

7. 抗 SLA 抗原肽单克隆抗体

【解析】

【分析】基因工程主要包括四部：首先提取目的基因；然后将目的基因与运载体结合；接着将目的基因导

入受体细胞；最后检测目的基因的表达。目的基因与运载体结合即基因表达载体的构建是基因工程的核心

步骤；PCR 技术是在模板 DNA、引物和四种脱氧核糖核苷酸存在下，依赖于 DNA 聚合酶的酶促合成反应，

因此这一技术的原理是 DNA 双链的复制。

【1题详解】

PCR 是在体外进行 DNA 复制，原理是 DNA 半保留复制，反应体系中应该有 Taq DNA 聚合酶、缓冲液、

引物、4 种dNTP 等。

【2题详解】

目的基因应插入启动子与终止子之间，引物的 5'端需连接限制酶识别序列，经分析表格中相关内切酶的切

割位点，a含有XbaI 别切割位点，b含有NotI 的识别切割位点，San3AI 的识别切割位点也存在于 BclI 的识

别切割位点中，4种引物中应选择的是 AB。

【3题详解】

载体上的复制原点与复制相关，能让表达载体大量扩增；该结构发挥作用时通常需要的酶是解旋酶（破坏

氢键）、DNA 聚合酶（聚合形成DNA），参与DNA 的复制。

【4题详解】

由图可知，质粒 C共有[4445+1100-（2310-2273）]=5508bp，用 Sau3AI 和XbaI 完全酶切质粒 B后，

Sau3AI 可识别并切割 BclI 的切割位点，具体分析见下图。所以酶切后可能得到的电泳条带如图所示：质

粒C共有[4445+1100-（2310-2273）]=5508bp，用 Sau3AⅠ 和XbaⅠ 完全酶切质粒 C后，BclⅠ、Sau3AⅠ 和

XbaⅠ 处均断开，质粒 C加入了目的基因片段，且BclⅠ 和Sau3AⅠ 的相对位置没有发生变化，因此，酶切后

固有的片段为 140bp 和3305bp，则另一片段为，5508-140-3305=2063。 C质粒三个片段分别是：

3305，2063，140。酶切后可能得到的电泳条带如图所示：

【5题详解】

最低致死浓度既可以让大部分没有抗性的细胞死亡又不会让具有抗性的细胞死亡；根据实验结果分析，最

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